Figura 1. Manejo de los pacientes: biopsia estándar versus biopsia líquida. Potencialmente, un análisis de sangre simple puede promover la identificación de tumores en una etapa temprana, en contraste con la biopsia estándar, que solo se puede hacer con una enfermedad avanzada. Además, la biopsia líquida tiene la ventaja de proporcionar una imagen dinámica del tumor, mientras que la biopsia estándar puede dar solo una imagen estática, resultante del pequeño tejido tumoral recogido. Finalmente, la biopsia líquida puede ser útil para monitorear la respuesta a la terapia, debido al hecho de que puede detectar mutaciones de resistencia novedosas que sugieren que el tumor ya no responde al tratamiento.
RESUMEN del articulo
En los últimos años, el creciente interés en la investigación se ha centrado en la llamada biopsia líquida. Un simple análisis de sangre ofrece acceso a una gran cantidad de información, que podría ser extremadamente útil para comprender o caracterizar enfermedades específicas. La sangre contiene diferentes moléculas, de las cuales el ADN libre circulante (ADNc), el ADN tumoral circulante (ADNc), las células tumorales circulantes (CTC) y las vesículas extracelulares (EV) son las más relevantes. Es concebible que estas moléculas tengan el potencial para el diagnóstico de tumores, monitorear la evolución del tumor y evaluar la respuesta al tratamiento y la resistencia farmacológica. Este articulo de revisión tiene como objetivo presentar un estado de la técnica, hasta la fecha, de los avances recientes en el ADN circulante y el ARN circulante en los tumores del estroma gastrointestinal (GIST).
El progreso en la biopsia líquida ha sido escaso en los GIST debido a varios problemas relacionados con la naturaleza de la patología. Es decir, la heterogeneidad en las mutaciones primarias y secundarias en los genes impulsores clave ha frenado en gran medida el desarrollo y la aplicación en los GIST, a diferencia de otros tipos de tumores en los que la biopsia líquida ya se ha traducido en la práctica clínica. Sin embargo, datos novedosos significativos han demostrado en los últimos años un potencial clínico significativo de ADNc, CTC, EV y ARN circulante en GIST.
Figura 2. Representación esquemática de la liberación de vesículas extracelulares (EV). Panel izquierdo: los exosomas (30–100 nm de tamaño) se liberan en el espacio extracelular de los cuerpos multivesiculares (MVB) a través de la exocitosis. Los MVB contienen varias vesículas intraluminales (ILV) que se generan por la gemación interna de la membrana del endosoma. La carga del exosoma puede incluir diferentes tipos de ARN, como miRNA, lncRNA, mRNA, que de otra forma se degradarían rápidamente si están libres. Panel derecho: las microvesículas (de 100 a 1000 nm de tamaño) se originan a través de una gemación / ampolla finamente regulada de la membrana plasmática que involucra el aparato de Golgi. Según la vía secretora clásica, las vesículas con su carga proteica se clasifican y empaquetan en el aparato de Golgi, y luego se transportan a la membrana plasmática. En el cáncer, se ha propuesto que existe un mecanismo adicional de liberación de EV. Específicamente, las células cancerosas pueden producir esferas multivesiculares (MVS),
Partes significativas del articulo……….
«» Por otro lado, la aplicación de la biopsia líquida para mejorar el diagnóstico temprano de GIST parece ser difícil. En particular, la heterogeneidad de las mutaciones primarias en KIT o PDGFRA y la escasez relativa de elementos circulantes en el torrente sanguíneo afectan claramente la sensibilidad. Además, la falta de métodos estandarizados de análisis se da cuenta de que todavía estamos muy atrasados en la aplicación de la biopsia líquida en GIST. Por lo tanto, para ampliar el conocimiento y la aplicación de la biopsia líquida en el diagnóstico precoz y el pronóstico, es necesario abordar las cuestiones metodológicas. A este respecto, las mutaciones de KIT exon 11, que representan aproximadamente el 90 % de las mutaciones de KIT, varían notablemente en longitud y ubicación; por lo tanto, su detección en plasma, a través de métodos basados en PCR es bastante problemático«»»»».
«» hay una necesidad urgente de técnicas mínimamente invasivas que permitan a un estricto seguimiento de paciente en diferentes puntos de tiempo; aquí origina el concepto de biopsia líquida. El desarrollo de un ‘biomarcador líquido’, que puede aislarse fácilmente de cualquier fluido corporal, representa una gran oportunidad para el diagnóstico temprano y monitoreo de la respuesta a medicamentos. A pesar de la expectativa prometedora, la investigación sigue en su fase embrionaria.«»
La biopsia líquida permite, entre otras aplicaciones, identificar en sangre una mutación que habitualmente se encuentra en un tejido por lo que, en muchos casos, se podrán evitar técnicas invasivas y dolorosas como la biopsia tradicional para conocer algunas características moleculares de ciertos tipos tumorales.
Resumen de las conclusiones…….
El estudio y la comprensión de los procesos biológicos que subyacen al desarrollo y la progresión del tumor han cambiado profundamente el tratamiento del cáncer, como se observó en los GIST. A principios de la década de 2000, imatinib revolucionó el campo del tratamiento dirigido, particularmente en una enfermedad en la que no había tratamientos efectivos disponibles en ese momento. La identificación de un estado genético específico (mutaciones KIT y PDGFR) en un tipo de tumor preciso (GIST) permite la selección de pacientes para terapias dirigidas. En este panorama, es extremadamente importante contar con herramientas disponibles para el diagnóstico precoz, mejorar el pronóstico, el monitoreo en tiempo real de la enfermedad y, en última instancia, la tasa de supervivencia.
Actualmente, la biopsia de tejido representa el estándar de oro para un diagnóstico preciso de cáncer; sin embargo, este enfoque tiene varias limitaciones, resumidas en la Figura 3. En vista de estos límites,existe una necesidad urgente de técnicas mínimamente invasivas que permitan un seguimiento estricto del paciente en diferentes momentos; Aquí se origina el concepto de biopsia líquida. El desarrollo de un ‘biomarcador líquido’, que puede aislarse fácilmente de cualquier fluido corporal, representa una gran oportunidad para el diagnóstico temprano y el monitoreo de la respuesta a los medicamentos. A pesar de la expectativa prometedora, la investigación aún se encuentra en su fase embrionaria. De hecho, podemos enumerar una serie de pros y contras ( Figura 3) relacionados con la biopsia líquida, mientras que para algunos componentes circulantes, como los exosomas, estamos incluso lejos de las aplicaciones clínicas.
Figura 3. Pros y contras de la biopsia líquida y estándar en GIST
En conclusión, la biopsia líquida ha entrado en la escena de la era de la medicina personalizada, lo que representa una herramienta clave para complementar las otras técnicas disponibles utilizadas habitualmente en la clínica. Con respecto a los GIST, un esfuerzo global debe considerarse obligatorio para traducir el uso de la biopsia líquida en la clínica.
fuente
texto integro y original
https://journals.sagepub.com/doi/full/10.1177/1758835919831902?fbclid=IwAR2Uk5G_cSSeu2uKJvzOk-72NE-YzdowAcRhhqiUCzEu8nHmkUXbqyQ3Uzc&
AMPLIAMOS INFORMACIÓN:
Utilidad del ADN tumoral circulante-biopsia líquida– en el tratamiento de pacientes con tumor del estroma gastrointestinal: análisis de 243 pacientes
PROPÓSITO del análisis
El tumor del estroma gastrointestinal (GIST) es el sarcoma más común del tracto gastrointestinal. El tratamiento de pacientes con GIST se determina mediante KIT , PDGFRA u otras alteraciones genómicas. El análisis de secuenciación de próxima generación (NGS) basado en tejidos es el enfoque estándar para el diagnóstico, el pronóstico y la selección del tratamiento. Sin embargo, el NGS basado en ADN tumoral circulante (ADNc)-biopsia líquida- es una alternativa novedosa y no invasiva.
Los resultados de secuenciación de ADNc-biopsia líquida- se evaluaron en muestras de sangre de 243 pacientes.
RESULTADOS-resumen
Nuestra comparación de ctDNA-biopsia líquida- con tejido NGS reveló un valor predictivo positivo (PPV) del 100%. El fracaso de la concordancia se observó en pacientes con carga de enfermedad baja o localizada.
El ADNc-biopsia líquida– proporciona un análisis rápido y no invasivo de las mutaciones actuales con un VPP alto para pacientes con GIST metastásico. Las pruebas basadas en ADNc-biopsia líquida- pueden ayudar a definir la elección óptima de la terapia en función de las mutaciones de resistencia y deben estudiarse de forma prospectiva
texto integro y original:
https://ascopubs.org/doi/abs/10.1200/PO.19.00253?journalCode=po
ampliamos información
Dr. César Serrano GarcíaDefiendo #SanidadPública
También dejo 3 trabajos más en #liquidbiopsy in #GIST. Junto con Jon Trent’s @JTrentMDPhD, recopilamos una buena información de la #ctDNA – biopsia líquida- de utilidad clínica
Desde mi grupo @VHIO
- Valor clínico de la secuenciación de próxima generación de ADN libre de células plasmáticas-biopsia líquida– en tumores del estroma gastrointestinal
Resumen de la investigación
El inicio y la evolución del tumor del estroma gastrointestinal (GIST) se enmarcan comúnmente por la activación oncogénica KIT / PDGFRA, y en etapas posteriores por la expansión policlonal de subpoblaciones resistentes que albergan mutaciones secundarias KIT después del inicio de la resistencia a imatinib. Por lo tanto, se espera que la determinación del ADN del tumor circulante (ct)-biopsia líquida– sea un biomarcador dinámico no invasivo informativo en pacientes con GIST.
Métodos-resumen
Realizamos secuenciación de próxima generación (NGS) en 60 genes clínicamente relevantes en 37 muestras de plasma de 18 pacientes con GIST recogidos prospectivamente. Las alteraciones de ADNc-biopsia líquida- se compararon con NGS de muestras de tejido tumoral emparejadas (obtenidas simultáneamente o en el momento del diagnóstico) y se validaron de forma cruzada con PCR digital de gotas (ddPCR).
Resultados-resumen
Pudimos identificar mutaciones de ADNc-biopsia líquida- en cinco de los 18 pacientes detectables en al menos. En general, la sensibilidad NGS para la detección de mutaciones de ADN libres de células (cf) en plasma-biopsia líquida- fue del 28,6%, mostrando una alta concordancia con la confirmación de ddPCR. El ctDNA-biopsia líquida- se detectó sólo en pacientes con GIST con enfermedad avanzada después del fallo de imatinib, prediciendo la dinámica del tumor en la monitorización en serie. Las mutaciones secundarias del KIT fueron el único mecanismo de resistencia encontrado en 10 pacientes con GIST resistentes a imatinib que progresaron a sunitinib o regorafenib.
Conclusiones
La evaluación de ADNc-biopsia líquida- con NGS detecta mutaciones primarias y secundarias de KIT en pacientes con GIST metastásico, particularmente después de la progresión de imatinib. GIST exhibe un bajo desprendimiento de ctDNA, pero el monitoreo de ctDNA, cuando es positivo, refleja la dinámica del tumor
texto integro y original:
bmccancer.biomedcentral.com/articles/10.11
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Estudio de fase I de la alternancia rápida de sunitinib y regorafenib para el tratamiento de los tumores estromales gastrointestinales refractarios inhibidores de la tirosina quinasa
Resumen
Objetivo: la aparición policlonal de mutaciones secundarias de KIT es un mecanismo principal de progresión de imatinib en el tumor del estroma gastrointestinal (GIST). Los inhibidores de KIT aprobados sunitinib y regorafenib tienen actividad complementaria contra las mutaciones de resistencia a KIT. La evidencia preclínica sugiere que la alternancia rápida de sunitinib y regorafenib amplía el espectro de subclones resistentes a imatinib específicos.
Conclusiones: la combinación de sunitinib y regorafenib es factible y tolerable. La alternancia rápida de TKI con actividad complementaria podría ser efectiva cuando se combinan fármacos con farmacocinética favorable, permitiendo potencialmente dosis activas y minimizando los eventos adversos. La monitorización en serie con ADNc-biopsia liquida– puede guiar el tratamiento en pacientes con GIST.
texto integro y original:
clincancerres.aacrjournals.org/content/25/24/
Desde @MezaZepeda y colegas:
La detección no invasiva de ctDNA-biopsia líquida- revela la heterogeneidad intratumoral y está asociada con la carga tumoral en el tumor del estroma gastrointestinal.
Resumen
El análisis molecular del ADN tumoral circulante (ADNc)-biopsia líquida– tiene un gran potencial para la aplicación clínica al capturar aberraciones específicas del tumor mediante un muestreo no invasivo. En tumor del estroma gastrointestinal (GIST), el análisis de las mutaciones de KIT y PDGFRA son importantes para las decisiones terapéuticas, pero la invasividad de las biopsias tradicionales limita las posibilidades de muestreo repetido. Utilizando la secuenciación dirigida de próxima generación, hemos analizado el ADN circulante libre-biopsia líquida– de células de 50 pacientes con GIST. Se detectaron mutaciones específicas del tumor en 16 de 44 muestras de plasma (36%) de pacientes sin tratamiento previo y en tres de seis (50%) pacientes tratados con inhibidores de la tirosina quinasa. Se encontró una asociación significativa entre la detección de ADNc y la clasificación de riesgo modificada de los Institutos Nacionales de Salud. Todos los pacientes con enfermedad metastásica tenían ADNc detectable, y la carga tumoral fue el determinante de detección más importante. El tamaño medio del tumor fue de 13,4 cm para pacientes con mutación detectable en plasma en comparación con 4,4 cm en pacientes sin mutación detectable ( P= 0.006). El análisis de ADNc de un paciente con progresión de la enfermedad con imatinib reveló que múltiples mutaciones de resistencia estaban presentes sincrónicamente, y un análisis detallado del tejido tumoral mostró que estaban distribuidas espacialmente en el tumor primario. Las muestras de plasma tomadas durante el curso del tratamiento demostraron que la evolución clonal puede monitorearse con el tiempo.
En conclusión, hemos demostrado que la detección de mutaciones específicas de GIST en plasma-biopsia liquida- es particularmente factible para pacientes con alta carga tumoral. En tales casos, hemos demostrado que el análisis mutacional mediante el uso de biopsias líquidas puede capturar la heterogeneidad molecular de todo el tumor y puede guiar las decisiones de tratamiento durante la progresión.
texto integro y original:
dlvr.it/RCtyw7
ampliamos información:
Gina Z. D'Amato, MD, analiza las limitaciones de la biopsia líquida en el sarcoma.https://www.onclive.com/view/dr-d-amato-on-the-limitations-of-liquid-biopsy-in-sarcoma
Gina Z. D'Amato, MD, profesora asociada y subdirectora de Investigación Clínica, Sylvester Comprehensive Cancer Center, University of Miami Health System, analiza las limitaciones de la biopsia líquida en el sarcoma.
En agosto de 2020, la FDA aprobó el Guardant360 ® biopsia líquido CDx para el perfilado genómico completa en pacientes con cualquier cáncer maligno sólido.
En el espacio del sarcoma, la biopsia líquida es prometedora, dice D’Amato. Antes de la aprobación, el ensayo Guardant360 CDx se utilizó en el sarcoma, principalmente para pacientes con tumores del estroma gastrointestinal.
Además, la prueba se utilizó en pacientes que tenían una progresión de la enfermedad donde el tejido no estaba disponible para la prueba, explica D’Amato.
La biopsia líquida puede tener una tasa de precisión más alta en comparación con la biopsia de tejido, explica D’Amato. Sin embargo, hasta que la tecnología mejore, la biopsia líquida no se utilizará como adyuvante. Actualmente, los pacientes deben tener una alta carga tumoral para que se detecte una alteración.
La investigación en curso sobre el ADN tumoral circulante podría proporcionar una forma de mejorar la precisión de las pruebas de biopsia líquida entre pacientes con baja carga tumoral o aquellos sin evidencia radiográfica de la enfermedad, concluye D’Amato.
informa
“punto de encuentro y de información de los pacientes de gist”
Colectivo Gist España 
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